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ARE-Luc/MCF7

CBPB0016

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產(chǎn)品數(shù)據(jù)庫(kù)
I. Background
      氧化應(yīng)激在細(xì)胞內(nèi)促氧化和抗氧化過程的平衡中起著重要作用。它涉及不同的人類疾 病,如慢性阻塞性肺疾?。–OPD)、帕金森病(PD)、阿爾茨海默?。ˋD)、癌癥和糖尿 病。Nrf2(核因子 E2 相關(guān)因子 2)是調(diào)控細(xì)胞氧化應(yīng)激防御系統(tǒng)的核心轉(zhuǎn)錄因子,通過結(jié) 合抗氧化反應(yīng)元件(ARE)激活下游基因表達(dá),維持細(xì)胞內(nèi)氧化還原平衡、解毒及抗炎, 其信號(hào)通路在癌癥、神經(jīng)退行性疾病及代謝紊亂中具有關(guān)鍵作用。大量證據(jù)表明,激活 Nrf2 通路可減少氧化應(yīng)激引起的炎癥損傷,抑制早期腫瘤的發(fā)生。因此,Nrf2 激活劑為肺 損傷、肝損傷、腎損傷、COPD、PD 和 AD 等炎癥性疾病提供了一種治療選擇。

      Nrf2/ARE 信號(hào)通路是細(xì)胞內(nèi)氧化還原平衡的主要途徑。在正常生理狀態(tài)下,Nrf2 位于 細(xì)胞質(zhì)中,通過與 Keap1 結(jié)合以 Keap1-Nrf2 復(fù)合物的形式錨定在胞漿內(nèi)肌動(dòng)蛋白骨架上, 并依賴 E3 泛素連接酶促進(jìn)泛素介導(dǎo)的 Nrf2 降解,以維持 Nrf2 活性的基本穩(wěn)態(tài)水平。在氧 化或親電應(yīng)激條件下,Nrf2 從 Keap1 釋放并易位到細(xì)胞核,與小肌肌腱神經(jīng)纖維肉瘤 (sMAF)蛋白形成異源二聚體,并與細(xì)胞保護(hù)基因啟動(dòng)子區(qū)域的 AREs 結(jié)合,觸發(fā) Nrf2 靶基因的轉(zhuǎn)錄。除了 Keap1 依賴性調(diào)控外,Nrf2 還可以通過 Neh6 結(jié)構(gòu)域被糖原合成酶激 酶 3(GSK-3)磷酸化。通過含有β-轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白重復(fù)序列的蛋白(β-TrCP)導(dǎo)致其泛素化和隨 后的蛋白酶體降解。
 
II. Background
     ARE-Luc MCF7 報(bào)告基因細(xì)胞,是由 ARE 調(diào)控并表達(dá) Luc 熒光素酶報(bào) 告基因的 MCF7 細(xì)胞。Sulforaphane 是 Keap1/Nrf2/ARE 的誘導(dǎo)劑,Bardoxolone 是 NRf2 的 激活劑,原原理見下圖所示。


Figure 1. ARE-Luc MCF7 原理示意圖
 
III. Introduction
Host Cell: ARE-Luc
Expressed gene: MCF7
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: MEM+10% FBS+ 1% NEAA+ 1mM NaP+150 μg/ml Hygromycin B
Mycoplasma Testing: Negative
Storage: Liquid nitrogen
 
IV. Description of Host Cell Line
Organism: Homo sapiens, human
Tissue: Mammary gland, breast; derived from metastatic site: pleural effusion
Disease: Breast adenocarcinoma
Morphology: Epithelial-like cells growing as monolayers
Growth Properties: Adherent
 
V. Representative Data
Figure 2. Induction of ARE activity by Sulforaphane in ARE-Luc MCF7(C59). Induction of ARE activity by Bardoxolone in ARE-Luc MCF7(C59).

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