三家公司均未檢測出10%的污染樣本，有兩家檢測出20%污染樣本和30%污染樣本，但是分析未報出全部差異位點，一家三個污染樣本均未檢出。通過分析結果發(fā)現(xiàn)，除了與CE的靈敏度相關外，與實驗人員對結果的判讀也有很大關系。

Fig 2. 不同污染占比濃度的STR樣本在三家公司Penta E基因座的STR檢測結果圖，其他20個基因座有類似的情況，文中不一一羅列。

1. 現(xiàn)狀與挑戰(zhàn)

傳統(tǒng)STR技術的局限性：STR（短串聯(lián)重復序列）作為法醫(yī)DNA鑒定的“金標準”，在檢測混合樣本及微量DNA樣本時，其靈敏度受到限制。尤其對于死者樣本中含有少量嫌疑人DNA的情況，毛細血管電泳技術可能無法有效檢出。

受到MSI（微衛(wèi)星不穩(wěn)定性）檢測的啟示：MSI伴隨診斷試劑盒，檢測限可達30%。雖然MSI主要針對單核苷酸和二核苷酸重復序列，技術難度較高，但也提示我們，四核苷酸重復序列的STR可能具備更高的靈敏度開發(fā)潛力。

新興技術的可能性：NGS（下一代測序）和dPCR（數(shù)字PCR）技術作為更為精準和靈敏的分子檢測工具，已在臨床、科研等領域展現(xiàn)出巨大的應用前景。將這些技術應用于STR檢測中，或許可以突破現(xiàn)有STR檢測的靈敏度瓶頸。

2. NGS與dPCR在STR檢測中的優(yōu)勢

NGS技術：

• 高靈敏度與多位點檢測：NGS可實現(xiàn)對多個STR位點的深度測序，提高檢測靈敏度，尤其適用于復雜混合樣本的分析。

• SNP與STR結合：已有公司推出基于SNP的NGS方法，這為STR檢測提供了新的思路。將NGS技術與STR檢測相結合，可提高樣本分辨率與靈敏度。

• 溯源與個體識別：NGS可以實現(xiàn)對微量DNA樣本的高通量檢測，區(qū)分相近細胞系，同時還可以檢測細微的污染，同時針對鼠源以及人源，不需要做二次實驗。

DdPCR技術：

• 超高靈敏度：dPCR通過將DNA樣本進行絕對定量分割，可實現(xiàn)對極微量DNA的精準定量，檢測靈敏度遠超傳統(tǒng)PCR技術。

• 絕對定量與低豐度檢測：dPCR在低豐度DNA檢測方面優(yōu)勢顯著，特別適用于微量DNA或高混合度樣本的分析。

• STR位點檢測的潛力：將dPCR技術應用于STR檢測，可進一步提升微量DNA的檢出能力，彌補傳統(tǒng)PCR的不足。

3.倡議與發(fā)展方向：

面對快速變化的科學需求和技術挑戰(zhàn)，STR技術的進一步升級迫在眉睫。為推動STR技術創(chuàng)新與優(yōu)化，滿足更高精度、更廣泛應用的需求，我們特此發(fā)出倡議：

• 研發(fā)更高靈敏度的NGS-STR方法：結合NGS的高通量與精準性，開發(fā)針對STR位點的高靈敏度測序方法，用于混合樣本鑒定。

• 探索dPCR在STR檢測中的應用：優(yōu)化數(shù)字PCR技術，使其能夠精準檢測微量、低豐度的STR位點，尤其是復雜背景下的樣本。

• 多技術融合：整合NGS、dPCR與SNP分析，形成靈敏度更高、分辨率更強的法醫(yī)物證鑒定體系。

•  其他方法學。